步骤1. 将细胞培养至90%密度，吸除培养液，用预冷1xPBS轻轻漂洗细胞。
2. 加入3ml预冷1xPBS，将细胞用细胞刮刮下转移至离心管。
3. 用预冷1xPBS洗涤细胞3次，100g-500g离心5min，弃上清。
4. 如样本为组织，将冰冻组织块剪碎，使用组织研磨仪将剪碎的组织块研磨充分。
5. 向细胞或组织碎片中加入5倍体积的RIPA裂解缓冲液。
6. 用移液枪吹打混匀细胞或组织碎片约1min，放置于4℃旋转反应45min。
7. 超声裂解，超声功率40kw，超声时间3s，间隔10s，超声25-30次，直至细胞团块或组织碎片全部打散，裂解液清亮。
8. 15000g-17000g离心5-10min，取上清，弃沉淀。
9. 用BCA试剂盒测定蛋白浓度，并用RIPA裂解缓冲液调整蛋白浓度至4mg/ml。
10. 分装裂解液，保存于-80℃。